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Estudio comparativo de agregación proteica de variantes N-terminal de Apoliproteína A-I humana
Por:
Universidad Nacional de La Plata
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Publicado en:
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Resumen:
Español
La amiloidosis es un grupo heterogéneo de enfermedades causadas por plegamiento anómalo de proteínas. Existen variantes naturales de Apolipoproteína A-I causantes de la enfermedad: Leu60Arg (L60R) y Trp50Arg (W50R) presentes en depósitos amiloides renales con localización: glomerular o tubuloinstersticial respectivamente.
Objetivo: analizar características estructurales de L60R y W50R para un estudio comparativo respecto a la proteína nativa (Wt) en cuanto estabilidad, susceptibilidad a la proteólisis y tendencia a la agregación frente a ligandos celulares: glucosaminoglucanos (heparina) y lípidos negativos (SDS).
Materiales y métodos: Los parámetros estructurales fueron analizados a pH: 7.4 y 5 por fluorescencia frente a guanidina clorhídrica, acrilamida y sonda Bis Ans. La susceptibilidad a la proteólisis mediada por tripsina a pH 7.4 se analizó por SDS PAGE. La tendencia a la agregación se evaluó por incubación de las proteínas a 37 °C, 48 horas a los pH mencionados en presencia y ausencia de ligandos midiendo intensidad de fluorescencia ligada a tioflavina T.
Resultados: L60R evidenció una inestabilidad estructural respecto a Wt y W50R, disminución de intensidad de Bis ANS que muestra pérdida de bolsillos hidrofóbicos por alteración de un dominio cremallera de leucina, un incremento en la agregación en presencia de SDS y una susceptibilidad mayor a la proteólisis con tripsina a pH 7.4; W50R mostró un ascenso de agregación con heparina a pH 5.
Conclusión: La desestabilización estructural de las variantes conduce a un plegamiento anómalo de las mismas, lo que podría producir exposición de sitios (para unión a ligandos o proteólisis) e inducir aumento de agregación, sobre todo en un micro entorno pro inflamatorio
Disciplinas:
Ciencias e Investigación - Bioquímica y Biofísica
Palabras clave :
Apolipoproteina A-I - Plegamiento anómalo - Ligandos celulares
Descriptores:
AMILOIDOSIS - PROTEOLISIS - PROTEÍNA - CÉLULA
Cómo citar este trabajo:
Gaddi, G.M; Finarelli, G.S; Gisonno, R; Ramella, N.A; Rosú, S.A.
(2018).
Estudio comparativo de agregación proteica de variantes N-terminal de Apoliproteína A-I humana.
Ponencia
Mendoza, .
Dirección URL del informe: /13170.
Fecha de consulta del artículo: 01/11/24.
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